Полный справочник медицинской аппаратуры - Коллектив авторов - Страница 48

Если клетки развивающегося эмбриона имеют неправильную форму или отходят от блестящей оболочки, или же скорость деления клеток существенно отличается от описанной выше, то развитие эмбриона считается патологическим и он непригоден для переноса в полость матки.

Оставшиеся эмбрионы хорошего качества могут быть сохранены при очень низкой температуре для дальнейших попыток (криоконсервация эмбрионов).

Так как в большинстве случаев эмбрион переносится в полость матки на стадии 8 или 16 клеток, то это означает, что эмбрион человека перед имплантацией должен содержаться в культуре в течение 3–4 суток.

Эмбрион в 0,05 мл культуральной среды осторожно засасывается в стерильный катетер диаметром 1,4 мм. Затем катетер проводится через цервикальный канал в полость матки, где в области дна эмбрион высвобождается из катетера. С целью облегчения проведения этой процедуры катетер следует разместить по длине для контроля положения его конца в полости матки. Помимо этого, следует очень аккуратно манипулировать шейкой матки во избежание сокращения мышц матки. Если в полость матки переносят более двух эмбрионов, существенно повышается риск многоплодной беременности. После переноса эмбрионов в полость матки назначают препараты прогестерона и эстрогены, чтобы поддержать имплантацию эмбриона. В этом случае говорят о поддержке лютеино-вой фазы.

Контроль подтверждения беременности

Для контроля ранних сроков развивающейся беременности проводят динамическое определение – субъединицы хориониче-ского гонадотропина, которое помогает определить беременность с 7-9-го дня после ТЭ. При наступлении беременности за женщинами ведется постоянное наблюдение методами, принятыми для ведения беременности и родов женщин с отягощенным акушерским анамнезом.

Должно производиться серийное ультразвуковое обследование плода. На 1-7-й неделе беременности определяются положение амниона и сердечная деятельность плода. После этого контроль должен производиться на 20, 28 неделе и далее с целью определения степени развития плода. На основании полученной информации можно наблюдать характеристики роста плода на протяжении беременности и выявить определенную патологию развития скелета. Пункцию амниона можно производить приблизительно на 16-й неделе беременности. Таким образом может быть определен кариотип и уровень фетопротеинов, определяющий наличие дефектов развития нервной трубки плода.

ИКСИ (инъекция сперматозоида в яйцеклетку) – это особая форма ЭКО, применяемая при тяжелых формах мужского бесплодия. При низком содержании подвижных сперматозоидов в эякуляте – тяжелой олигозооспермии и/или астенозооспермии, и/или тератозооспермии вероятность оплодотворения очень мала. Поэтому основной задачей ИКСИ является осуществление проникновения сперматозоида через оболочку яйцеклетки – оплодотворение. Для успешного проведения ИКСИ достаточно наличия в эякуляте единичных живых сперматозоидов.

Показанием к ИКСИ является также тяжелое аутоиммунное бесплодие у мужчин при титре антиспермальных антител в сперме более 50 %. В этом случае, как правило, количество подвижных сперматозоидов существенно снижено.

ИКСИ применяется также при недостаточном оплодотворении в предыдущих попытках (оплодотворено менее 50 %), при малом количестве яйцеклеток.

Под инвертированным микроскопом сперматозоид втягивают в очень тонкую стеклянную иглу и инъецируют непосредственно в яйцеклетку.

Такая микроинъекция имитирует естественный процесс проникновения сперматозоида в яйцеклетку. Эта процедура не оказывает отрицательного влияния на слияние пронуклеусов яйцеклетки и сперматозоида. Если оплодотворение и деление произошло, как и при процедуре ЭКО, спустя 2–5 дней эмбрион переносят в полость матки.

Как только оплодотворение произошло, качество эмбрионов и вероятность наступления беременности после ИКСИ не отличаются от таковых после традиционного ЭКО.

Для осуществления ЭКО необходима рабочая станция, в состав которой входят: ламинарные шкафы, термостаты и подогреваемые поверхности, антивибрационный стол, криоконсерватор, СО2 инкубаторы, стереомикроскопы.

Ламинарные шкафы и рабочие станции предназначены специально для работы с ооцитами, эмбрионами и спермой в лабораториях ЭКО. Они обеспечивают циркуляцию ламинарного потока воздуха для предотвращения контаминации, класс I биологической защиты (защита материала), имеют встроенную увлажнительную систему и большой выбор опций для формирования рабочей станции ЭКО нужной конфигурации.

Антивибрационные столы обеспечивают оптимальные условия для проведения процедур ЭКО и ИКСИ.

Термостаты и подогреваемый столы необходимы для культивирования и транспортировки половых клеток и эмбрионов в пределах лаборатории в условиях постоянной температуры, как правило, это около 37 °C.

Криоконсерватор необходим для криоконсервации спермы, яйцеклеток и эмбрионов. Имеет модульную структуру и состоит из контроллера температуры, криокамеры и криованны. Такие устройства поддерживают диапазон температур от -120 до +40 °C, имеют несколько предустановленных программ, предупреждающий сигнал при изменении температуры более чем на 1,5 °C, минимальный температурный шаг 0,04 °C, соединение с компьютером.

СО2-инкубаторы могут быть настольными и портативными разнообразных размеров. Инкубаторы имеют несколько изолированных камер для биоматериала, диапазон поддерживаемой температуры зависит от конструкции прибора, производителя и поставленных целей. Портативные СО2 инкубаторы имеют встроенную батарею, обеспечивающую бесперебойную работу аппарата при транспортировке образцов, систему тревог по температуре и заряду батареи.

Также для нормальной работы ЭКО-лаборатории необходимы расходные материалы: среды для культивирования, для промывки спермы, пробирки, чашки Петри, 4-луночные планшеты, пипетки, криопробирки, криосоломки, микропипетки для ИКСИ, наконечники для стриппера для очистки ооцитов, наборы для пункций, катетеры для переноса, фильтры для шприцов, стерильное минеральное масло.

Глава 5

ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ИНСТРУМЕНТЫ

Щелевые лампы и офтальмоскопы

Одним из методов исследования зрительного нерва, сосудистой оболочки и сетчатки является офтальмоскопия, существует несколько видов и методов: офтальмоскопия в обратном виде, непрямая бинокулярная, офтальмоскопия в прямом виде и офталь-мохромоскопия. Глазное дно, как правило, исследуют в темном помещении и при широком зрачке, для чего проводят атропини-зацию, противопоказана данная процедура лицам, страдающим глаукомой и с атрофией сфинктера зрачка. При офтальмоскопии оценивают диск зрительного нерва: его форму, цвет (в норме желтовато-розовый), границы. В центре диска имеется углубление – физиологическая экскавация, это место перегиба волокон зрительного нерва. Дают оценку артериям и венам: калибр, извитость, склерозированность.

Световую щель фокусируют на ту ткань, которая подлежит осмотру. Тонкий большой силы световой пучок позволяет получить оптический срез на полупрозрачных и прозрачных тканях. Так, при исследовании роговицы можно видеть ее толщину, неоднородность оптической плотности разных ее слоев, вид и ход нервных веточек, мельчайшие отложения на задней поверхности роговицы. Также можно исследовать ток крови в краевой петлистой сосудистой сети и сосудах коньюнктивы. Отчетливо видны повреждения хрусталика. Можно применять щелевые лампы в сочетании с гониоскопом для исследования угла передней камеры глаза.

Щелевая лампа состоит из осветителя, или собственно щелевой лампы, бинокулярного микроскопа, лицевого установа, координатного и инструментального столиков. Осветитель и микроскоп смонтированы вместе на координатном столике, что обеспечивает в процессе работы их совместное перемещение в разные стороны. В основной части прибора – осветителе – источником света служит электрическая лампа СЦ-69 (6) (6В, 25Вт), питающаяся от общей осветительной сети напряжением 127 или 220 В через понижающий трансформатор. Цоколь лампы впаян в специальную центрирующую обойму, которая помещается в патроне в таком положении, что нить накала лампы располагается вдоль вертикальной осветительной щели. Это обеспечивает наибольшую освещенность вертикального изображения щели. Патрон в корпусе осветителя закрепляется зажимной гайкой. Несколько выше лампы находится конденсор в оправе, состоящий из двух линз, обеспечивающих концентрацию светового пучка, излучаемого лампой. Над конденсором расположен механизм щели.